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연구

연구내용

NAADP(Nicotinic acid adenine dinucleotide phosphate)란?

인체에 존재하는 물질로 생화학적인 효소 합성법으로 생산된 세포 신호 전달 물질입니다.

NAAD와 NADP의 구조

세포내 존재하는 효소인 CD38 phosphatase는 NADP를 기질로 하여 NAADP를 생산하며, 원료로서 NAADP는 세포와 유사한 효소반응을 통하여 생산됨

세포 내 NAADP의 작용기전

세포 내 소기관인 ER 등에 저장된 칼슘이온 분화를 촉진하는 신호로서 작용하도록 유도하는 NAADP의 세포 내작용원리

각질형성세포 분화촉진인자로써 NAADP의 효능
NAADP의 세포 내 칼슘이온 증가 확인
세포 : NHEK-Np(Epidermal Keratinocyte neonatal, LONZA)
측정 : 표지안자(fluo-3 AM)를 Confocal microscopy(Laser source)
결과 : 0.1nM부터 100nM까지 농도에 따라 세포 내 칼슘이온 신호증가. 1mcM에서 신호감소
고찰 : NAADP는 분화를 촉진하는 칼슘이온의 증가를 유도함. 고농도에서 세포가 스스로 NAADP의 반응을 조절할 수 있음
NAADP에 의한 각질형성 세포의 분화지표 측정 (in Vitro assay)
세포 : NHEK-Np(Epidermal Keratinocyte neonatal, LONZA)
방법 : 분화 시 발현되는 표지인자(keratin 1/10, involucrin) 함량을 Western bloting
결과 : 분화표지인자 1nM~10nM에서 가장 높은 반응을 나타냄
고찰 : NAADP에 의해 유도된 칼슘이온이 세포의 분화를 유도하였음을 확인
NAADP에 의한 피부의 분화 지표 측정 (Immuno histochemistry)
세포 : 6주령 hairless mouse(SPF/VAF Crl : SKH1-hr), 오리엔트바이오
방법 : 농도별 NAADP 수용액을 면봉으로 1일 2회 7일간 도포 후 절편하여 항체처리
결과 : 대조군과 비교하여 농도별로 처리된 NAADP는 분화표지인자의 발효를 상승시킴
고찰 : in vitro assay에서 확인된 NAADP의 효능이 동물의 피부에서 나타남을 확인
탈모인자 억제, 발모 인자 촉진으로서의 NAADP의 획기적인 두가지 효능
NAADP 의 Human Dermal papilla cell (HDP) 세포 안정성 확인
Dihydrotestosterone (DHT)를 처리한 모유두 세포에서. NAADP를 추가하였을 때, 발모 인자인 Wnt signal이 증가하며, 탈모인자인 DKK-1등이 억제됨을 확인

NAADP가 Wnt/ß-catenin 신호전달을 촉진시키는 것을 확인

모유두세포에 탈모를 유발시키는 DHT와 NAADP를 동시처리 하였을 때 NAADP는 DHT를 처리한 시험군 보다 DKK-1 억제와 β-catenin발현을 촉진을 확인할 수 있었다

결론